（2014•孝感二模）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起．请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：（1）主要步骤：

Question

（2014•孝感二模）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起．请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：
（1）主要步骤：
①制备两种培养基：一种是______培养基，另一种______的培养基．分别分成两份，依次标上A，A′的B，B′，备用．
②分别向A、B培养基中接种______．
③接种后，放在恒温箱中培养3～4天．
④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A′、B′培养基中．
⑤接种后，把A′、B′培养基放入恒温箱中培养3～4天．
（2）回答问题：
在步骤①中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主人措施有______、______、______．
第④⑤两个步骤的目的是______．

Answer 1

（1）将微生物进行分离一般采用选择培养基．选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长．圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖．根据这一原理可将两种微生物分离开来．
（2）在微生物培养过程中的灭菌措施有：培养基和培养皿的高压蒸气灭菌、金属用具的灼烧灭菌、接种过程在酒精灯火焰附近进行等．为获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌，可以用选择培养基重复进行选择培养．
故答案为：
（1）无氮　 加青霉素　 混合菌
（2）培养基高压蒸气灭菌　　接种环在酒精灯火焰上灭菌　　接种过程在酒精灯火焰附近进行　　　　
获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌．