人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源．现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

Question

人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源．现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：
（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括______和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有______（答2种）．
（2）采用______法将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养．在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在______旁进行操作．接种后的培养皿______于37℃的恒温箱中培养．
（3）用______培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于______培养基．若培养基中存在有脲酶的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的______，遇培养基中加入的酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源．变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力______．
（4）与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数______．
A．多     B．少    C．相等     D．几乎为零．

Answer 1

（1）用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等都必须是无菌的；常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌．
（2）采用稀释涂布平板法将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养；为避免杂菌污染，操作要在酒精灯火焰旁操作，为防止水蒸气在皿盖上凝结会产生水滴，培养皿需要倒置在恒温培养箱中培养．
（3）酚红指示剂可用于鉴别微生物，所以含有酚红指示剂的培养基属于鉴别培养基；尿素被分解成氨可使PH呈碱性，变色区域越大，说明其分解能力越强．
（4）以尿素为氮源的培养基中菌落数少，因为其他微生物不能在该环境中生存．
故答案为：
（1）接种工具和培养基   高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌、干热灭菌
（2）稀释涂布平板法    酒精灯火焰旁   倒置 
（3）鉴别     氨      越强
（4）B