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分子克隆问题,下面这句话是我在看N端原则的时候看到的,看不懂有时除了全长目的蛋白还会发现未完全表达的截短蛋白.一个显见的解释就是蛋白降解;而次翻译起始位点是另一种可能(Hallin

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分子克隆问题,下面这句话是我在看N端原则的时候看到的,看不懂
有时除了全长目的蛋白还会发现未完全表达的截短蛋白.一个显见的解释就是蛋白降解;而次翻译起始位点是另一种可能(Halling and Smith,1985; Preibisch et al.,1988).若一个类似核糖体结合位点(AAGGAGG)的序列加上适当的间隔序列(一般为5-13 核甘酸),位于AUG(Met)密码子上游,会发生上述情况.当试图纯化全长蛋白时,截短蛋白会成为一个麻烦.我想问的是:他说在核糖体结合位点加上一些序列,加了以后就打乱了该结合位点吗,是不是就不能结合核糖体了,什么叫次翻译起始位点,启动子有没有改变?
▼优质解答
答案和解析
若一个类似核糖体结合位点(AAGGAGG)的序列加上适当的间隔序列(一般为5-13 核甘酸)
这里说的是AUG的上游需要有AAGGAGG,但是AAGGAGG和AUG之间需要有5-13个核苷酸的距离做间隔,这样才能开始翻译.也就是说AAGGAGG和AUG之间距离太近或太远都是不行的.
次翻译起始位点就是在正常翻译起始位点的下游又有一个起始位点,从这里开始翻译的话得到的蛋白自然就会比原蛋白短一截喽.
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