HPLC分析一物质,如何消除梯度峰?HPLC分析一物质,走的是梯度,有梯度峰,除了考虑更换里面的缓冲盐,和有机溶剂,和色谱柱,水以外,还有什么办法消除梯度峰?

Question

HPLC分析一物质,如何消除梯度峰?
HPLC分析一物质,走的是梯度,有梯度峰,除了考虑更换里面的缓冲盐,和有机溶剂,和色谱柱,水以外,还有什么办法消除梯度峰?

Answer 1

如果是紫外检测器,是无法完全消除的,信号的产生不仅仅是吸收,还有反射等,梯度洗脱时流动相的变化肯定会引起响应的变化.如果用ELSD就没有.
所谓的梯度峰,是在进行空白梯度是能够重现的色谱曲线变化,如果不能重复,则有两种可能：
1.有杂质洗脱出来
2.色谱系统不一致（在进行梯度洗脱时,完全一致的条件,第1针和后续的进样会有差异——梯度开始时流动相的洗脱能力弱,会有杂质的富集）
赞同chromsep的看法,可以用空白梯度来扣除；但如果目标峰在洗脱曲线变化明显的位置出峰,建议调整梯度,使两者错开.