肺气肿病在北美比较常见，病人以前只能依赖于注射人的α-抗胰蛋白酶做替代疗法，但价格昂贵，英国罗斯林研究所研制成功的转基因羊，其乳汁中含有α-抗胰蛋白酶，可治疗肺气肿病．回

Question

肺气肿病在北美比较常见，病人以前只能依赖于注射人的α-抗胰蛋白酶做替代疗法，但价格昂贵，英国罗斯林研究所研制成功的转基因羊，其乳汁中含有α-抗胰蛋白酶，可治疗肺气肿病．回答下列问题：
（1）为获取目的基因，需要在肝脏细胞中提取___，通过反转录产生cDNA．
（2）α-抗胰蛋白酶基因与___等调控组件重组在一起，构建基因表达载体，然后通过___技术，导入羊的受精卵中．也可以将构建好的基因表达载体导入羊体细胞中，再通过___将该体细胞核注入处于___期的去核的卵母细胞中．
（3）通过早期胚胎培养，得到早期胚胎．为了选育出能泌乳的雌羊，一般在胚胎的___部位取样，做性别鉴定．
（4）α-抗胰蛋白酶是一种糖蛋白，一般不用传统的转基因大肠杆菌生产，因为___．

Answer 1

（1）反转录是指以RNA为模板合成DNA的过程，因此为获取目的基因，需要在肝脏细胞中提取α-抗胰蛋白酶mRNA，通过反转录产生cDNA．
（2）基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因和标记基因等，要使目的基因只在乳腺组织细胞中表达，因此需将α-抗胰蛋白酶基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，构建基因表达载体；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；可将构建好的基因表达载体导入羊体细胞中，再通过 核移植技术将该体细胞核注入处于减数第二次分裂中期的去核的卵母细胞中．
（3）进行性别鉴定时，一般在胚胎的滋养层部位取样．
（4）由于大肠杆菌是原核细胞，不含有内质网、高尔基体等细胞器，不能对蛋白质进行糖基化修饰，产生有活性的α-抗胰蛋白酶，因此一般不用传统的转基因大肠杆菌生产．
故答案为：
（1）α-抗胰蛋白酶mRNA
（2）乳腺蛋白基因的启动子      显微注射      核移植技术     减数第二次分裂中
（3）滋养层     
（4）大肠杆菌是原核细胞，不含有内质网、高尔基体等细胞器，不能对蛋白质进行糖基化修饰，产生有活性的α-抗胰蛋白酶