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DNA定量测定实验中加入乙醛的作用是什么,
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DNA定量测定实验中加入乙醛的作用是什么,
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答案和解析
DNA定量测定方法有很多种,有紫外吸收法、定磷法、颜色反应比色法(二苯胺法).
其中二苯胺法是最常用的DNA定量测定方法,这个要加入乙醛应该也是二苯胺法.
加入乙醛的作用:
1.可以提高二苯胺法中DNA的发色量;
2.减少脱氧木糖和阿拉伯糖的干扰,提高灵敏度;
二苯胺法定量DNA,是根据在酸性环境下,脱氧核糖变成ω—羟基—γ酮基戊醛,而ω—羟基—γ酮基戊醛与二苯胺试剂加热发生蓝色反应,在595nm处有最大吸收.DNA在20~400ug/ml时光密度与DNA量成正比.脱氧木糖和阿拉伯糖有同样的反应.
其中二苯胺法是最常用的DNA定量测定方法,这个要加入乙醛应该也是二苯胺法.
加入乙醛的作用:
1.可以提高二苯胺法中DNA的发色量;
2.减少脱氧木糖和阿拉伯糖的干扰,提高灵敏度;
二苯胺法定量DNA,是根据在酸性环境下,脱氧核糖变成ω—羟基—γ酮基戊醛,而ω—羟基—γ酮基戊醛与二苯胺试剂加热发生蓝色反应,在595nm处有最大吸收.DNA在20~400ug/ml时光密度与DNA量成正比.脱氧木糖和阿拉伯糖有同样的反应.
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