请问怎样利用流式细胞仪分析细胞存活率、细胞周期和ROS?希望前辈们帮忙,

Question

请问怎样利用流式细胞仪分析细胞存活率、细胞周期和ROS?希望前辈们帮忙,

Answer 1

1 测定细胞存活率 1.1取对数生长期的细胞,均以4×10 5 /mL 密度接种于6孔细胞培养板上；1.2培养过夜后,用相应药物处理细胞；1.3 消化收集细胞,包括培养液中悬浮的死细胞；1.4 300g离心5 min,去上清；1.5 加1mL PBS缓冲液重悬细胞,再次离心去上清1.6 最后重悬细胞于含5 g/mL碘化丙啶(propidium iodide,PI)的PBS缓冲液中(PI buffer：3.4 mM 柠檬酸钠(Trisodium Citrate),9.65 mM NaCl,PI 20 mg/mL,0.03% Nonidet P-40 ,配于H 2 O中)；1.7 避光冰上孵育10 min,上流式细胞仪测定细胞存活率.2 测定细胞周期 2.1取对数生长期的细胞,均以4×10 5 /mL 密度接种于6孔细胞培养板上；2.2培养过夜后,用相应药物处理细胞；2.3 消化收集细胞,包括培养液中悬浮的死细胞；2.2 收集的细胞经PBS缓冲液洗一次后,去上清,将细胞逐滴加入70%预冷的乙醇中,4℃避光固定30 min； ……………… 详细资料请参考：on http://product.bio1000.com/101965/