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(2013•怀远县模拟)探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段,可用于核酸分子杂交以检测目标核苷酸序列是否存在.右图一是某实验小组制备
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(2013•怀远县模拟)探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段,可用于核酸分子杂交以检测目标核苷酸序列是否存在.右图一是某实验小组制备的两种探针,图二是探针与目的基因杂交的示意图.请回答下列有关问题:
(1)核酸探针与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循______的原则.设计核苷酸序列是核酸探针技术关键步骤之一.图一所示的两种核酸探针(探针2只标注了部分碱基序列)都不合理,请分别说明理由______、______.
(2)cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针.制备cDNA探针时,首先需提取、分离获得______作为模板,在______的催化下合成cDNA探针.利用制备好的β-珠蛋白基因的cDNA探针与β-珠蛋白基因杂交后,出现了如图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构”,原因是______.
(3)利用乳腺生物反应器生产α-抗胰蛋白酶,在胚胎移植前,先要从早期胚胎的______
部位取样,再利用SRY探针(Y染色体上的性别决定基因)进行检测,将检测反应呈______ (选填“阳”、“阴”)性的胚胎进行移植.
(1)核酸探针与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循______的原则.设计核苷酸序列是核酸探针技术关键步骤之一.图一所示的两种核酸探针(探针2只标注了部分碱基序列)都不合理,请分别说明理由______、______.
(2)cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针.制备cDNA探针时,首先需提取、分离获得______作为模板,在______的催化下合成cDNA探针.利用制备好的β-珠蛋白基因的cDNA探针与β-珠蛋白基因杂交后,出现了如图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构”,原因是______.
(3)利用乳腺生物反应器生产α-抗胰蛋白酶,在胚胎移植前,先要从早期胚胎的______
部位取样,再利用SRY探针(Y染色体上的性别决定基因)进行检测,将检测反应呈______ (选填“阳”、“阴”)性的胚胎进行移植.
▼优质解答
答案和解析
(1)核酸探针是单链DNA分子,其与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循碱基互补配对的原则.图一中探针1碱基序列过短,特异性差;探针2自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效.因此这两种探针都不合理.
(2)cDNA是以mRNA为模板逆转录形成的,该过程需要逆转录酶的催化.逆转录法合成的cDNA不含内含子,而β-珠蛋白基因中含有不表达序列(或内含子),因此探针利用制备好的β-珠蛋白基因的cDNA探针与β-珠蛋白基因杂交后,出现了如图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构.
(3)利用乳腺生物反应器生产α-抗胰蛋白酶时,应选择雌性胚胎进行移植.所以在胚胎移植前,先要从早期胚胎的滋养层部位取样,再利用SRY探针进行检测,将检测反应呈阴性(雌性)的胚胎进行移植.
故答案:(1)碱基互补配对 探针1碱基序列过短,特异性差
探针2自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效
(2)mRNA 逆转录酶 β-珠蛋白基因中含有不表达序列(或内含子)
(3)滋养层 阴
(2)cDNA是以mRNA为模板逆转录形成的,该过程需要逆转录酶的催化.逆转录法合成的cDNA不含内含子,而β-珠蛋白基因中含有不表达序列(或内含子),因此探针利用制备好的β-珠蛋白基因的cDNA探针与β-珠蛋白基因杂交后,出现了如图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构.
(3)利用乳腺生物反应器生产α-抗胰蛋白酶时,应选择雌性胚胎进行移植.所以在胚胎移植前,先要从早期胚胎的滋养层部位取样,再利用SRY探针进行检测,将检测反应呈阴性(雌性)的胚胎进行移植.
故答案:(1)碱基互补配对 探针1碱基序列过短,特异性差
探针2自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效
(2)mRNA 逆转录酶 β-珠蛋白基因中含有不表达序列(或内含子)
(3)滋养层 阴
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