受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶（PPO）和底物（酚类物质）直接接触，引起马铃薯的褐变，为探究温度对PPO活性的影响，实验小组进行如下实验：（1）PPO粗提液的提取低温下将新鲜马铃薯

Question

受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶（PPO）和底物（酚类物质）直接接触，引起马铃薯的褐变，为探究温度对PPO活性的影响，实验小组进行如下实验：

（1）PPO粗提液的提取
低温下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮，取20g样品放入含50mL磷酸缓冲液（PH值为5.5）的研钵中，同时加入少量石英砂，研磨、离心、上清液即为PPO的粗提液，加缓冲液研磨的目的是___
（2）不同温度下PPO活性的测定

步骤顺序	试管1	试管2	试管3	试管4	试管5	试管6	试管7	试管8
PPO粗提液	2mL		2mL		2mL		2mL
酚类底物		2mL		2mL		2mL		2mL
反应	混合振荡		混合振荡		混合振荡		混合振荡
温度预处理	（5min）0℃		15℃		30℃		45℃
保温时间	5min		5min		5min		5min
记录结果	+		++++		++++		++

（注：反应底物充足；实验结果中“+”越多褐色越深）
①实验步骤顺序有不妥之处，请改正___．
②实验结果表明：15℃和30℃温度条件，PPO具有相同的活性，从酶的特性分析其原因是___．
③为进一步探究PPO最适温度，应在___范围内设置温度梯度．
（3）I．在温度30℃的条件下，取等量提取液分别加到四支盛有等量过氧化氢溶液、pH分别为3、5、7、9的试管中，结果发现每一支试管都产生气体．请回答：
①该实验的课题是：___．
②各实验组均在30℃下进行的原因是：a___；b___．
Ⅱ．将加入4支试管中的马铃薯提取液的量减半，重复实验I．分别测定实验I、Ⅱ中过氧化氢在相同时间内的含量变化，绘制成如图所示曲线，请回答：曲线A是实验___（选填I或Ⅱ）的结果．

Answer 1

（1）过酸、过碱都会使酶的空间结构被破坏，使酶失活，研磨时加缓冲液研磨的目的是防止酚氧化酶（PPO）失活．
（2）①本实验应该将酶和底物先放在不同的温度条件下一段时间，再将相同温度下的酶和底物混合，故“反应”步骤改在“温度预处理”之后．
②15℃和30℃温度条件，PPO具有相同的活性，是因为在酶的最适温度前后，可以有不同的温度条件相同的催化效率．
③15℃和30℃温度条件，PPO具有相同的活性，故该酶的最适温度位于15℃-30℃之间，故在15℃-30℃范围内设置温度梯度，可以进一步探究酶的最适温度．
（3）Ⅰ、①该题自变量是不同pH值，因变量为酶活性，所以实验目的是探究不同pH对过氧化氢酶活性的影响．
②30℃是过氧化氢酶的适宜温度，恒温是排除温度变化（无关变量）对实验结果的影响．
Ⅱ、图中的A曲线和B曲线相比，A曲线在相同时间情况下，底物剩余量较B多，说明酶量更少，是实验Ⅱ结果的曲线．
故答案为：
（1）保持PPO的活性（防止PPO失活）
（2）①“反应”步骤改在“温度预处理”之后
②在酶的最适温度前后，可以有相同的催化效率
③15℃∼30℃
（3）Ⅰ．①探究不同PH对过氧化氢酶活性的影响
②30℃是过氧化氢酶作用的适宜温度   排除温度变化（无关变量）对实验结果的影响 
Ⅱ．Ⅱ