在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kanr）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．下图为获得抗虫棉的技术流程．请据图回答下列问题

Question

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan^r）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．下图为获得抗虫棉的技术流程．请据图回答下列问题：

（1）A过程所用的载体是___，需要的工具酶有___和___．
（2）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入___．
（3）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用___作为探针．
（4）由图中离题棉花叶片组织获得转基因抗虫植株可利用___技术，该技术所依据的原理是___．
（5）如果从个体生物水平来鉴定，D过程可利用的最简单的检测方法是___．

Answer 1

（1）图中A为基因表达载体的构建过程，该过程所用的运载体是含kanr质粒；构建基因表达载体时，首先需用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．
（2）标记基因是卡那霉素抗性基因，因此C过程的培养基除含有必需的营养物质、琼脂和激素外，还需加入卡那霉素．
（3）探针是指用放射性同位素（或荧光分子）标记的含有目的基因的单链DNA片段．因此D过程应该用放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因作为探针．
（4）将离体棉花叶片组织培养成再生植株还需要采用植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞的全能性．
（5）从个体生物水平上鉴定，D过程可用的最简单检测方法是让棉铃虫食用再生植株（抗虫接种实验）．
故答案为：
（1）含kan^r的质粒      限制性内切酶      DNA连接酶
（2）卡那霉素
（3）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因
（4）植物组织培养   植物细胞具有全能性
（5）让棉铃虫食用再生植株（或抗虫接种实验）