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关于定量pcr的效率值问题请教一下各位高手,本人现在在学习定量PCR,用的是MJResearch的Opticon2这个型号的仪器.但是每次和师兄做的时候效率值都很低,只有50%-60%;在此想请教一下大家:1.Optico
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关于定量pcr的效率值问题
请教一下各位高手,本人现在在学习定量PCR,用的是MJ Research的Opticon2 这个型号的仪器.但是每次和师兄做的时候效率值都很低,只有50%-60%;在此想请教一下大家:1. Opticon2 里面的这效率值是自己给出的,不需要我们计算,但是好像要自己设定程序,再通过我们不同数量级的加样算出来,但是师兄做的时候从来不做标准曲线,这个效率值可信么?(溶解曲线倒是很不错...) 2. 这个效率值对最后的结果分析有没有影响? 谢谢各位了~ 如果有用同一型号仪器的大神,请不吝赐教 :)
请教一下各位高手,本人现在在学习定量PCR,用的是MJ Research的Opticon2 这个型号的仪器.但是每次和师兄做的时候效率值都很低,只有50%-60%;在此想请教一下大家:1. Opticon2 里面的这效率值是自己给出的,不需要我们计算,但是好像要自己设定程序,再通过我们不同数量级的加样算出来,但是师兄做的时候从来不做标准曲线,这个效率值可信么?(溶解曲线倒是很不错...) 2. 这个效率值对最后的结果分析有没有影响? 谢谢各位了~ 如果有用同一型号仪器的大神,请不吝赐教 :)
▼优质解答
答案和解析
首先你要确定你做的是什么定量,是相对定量还是绝对定量,相对定量有两种方法,一种是标准曲线法,一种是ΔΔCt法,你师兄可能做的第二种方法,是不需要做标曲的,而你做的是第一种方法标准曲线法,做一要经过浓度梯度稀释来...
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