某生物兴趣小组尝试从土壤中筛选出纤维素分解菌（流程见下图），并进行计数实验，请回答下列问题：（1）培养皿灭菌常用的两种方法是；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该．

Question

某生物兴趣小组尝试从土壤中筛选出纤维素分解菌（流程见下图），并进行计数实验，请回答下列问题：

（1）培养皿灭菌常用的两种方法是___；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该___．
（2）将采集的土样加入装有50ml以___为唯一碳源的___（填“固体”或“液体”）培养基中，按步骤①→③进行培养，培养过程中需将锥形瓶放在摇床上震荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能___．
（3）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是防止___．
（4）用平板划线法纯化菌株的过程中，在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原因是___．采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是___．实验结束后，使用过的培养基应该进行___处理后，才能倒掉．

Answer 1

（1）灭菌常用方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等，培养皿常用高压蒸汽灭菌、干热灭菌．将培养皿放入灭菌锅之前通常用牛皮纸或报纸包扎避免灭菌后的再次污染．
（2）题干中说“尝试从土壤中筛选出纤维素分解菌”，故将采集的土样加入装有50ml以纤维素为唯一碳源的液体培养基中，按步骤①→③进行培养，培养过程中需将锥形瓶放在摇床上震荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能增加培养液中的溶氧量．
（3）由于培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果，因此在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多．
（4）用平板划线法纯化菌株的过程中，由于线条末端细菌的数目比线条起始处要少，所以在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线；采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基．实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉．以免造成污染．
故答案为：
（1）干热灭菌、湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）       用牛皮纸包扎器皿
（2）纤维素         液体          增加培养液中的溶氧量
（3）培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果
（4）线条末端细菌的数目比线条起始处要少         防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基         灭菌