使用氨基色谱柱分析左卡尼汀时遇到了麻烦,刚开始使用第一根氨基色谱柱时左卡尼汀杂质A在主峰的后面,并且分离度很好都能达到基线分离；后来理论板数降低,试用第二根新色谱柱,竟然分

Question

使用氨基色谱柱分析左卡尼汀时遇到了麻烦,
刚开始使用第一根氨基色谱柱时左卡尼汀杂质A在主峰的后面,并且分离度很好都能达到基线分离；后来理论板数降低,
试用第二根新色谱柱,竟然分不开；
第三根竟然左卡尼汀杂质A在主峰前面起了一个大包更是分不开；
第四根更不可思议的是左卡尼汀杂质A在主峰前面出峰,分离度1.6,但未达到基线分离,可是按照BP和EP的要求都是在主峰后面出峰,流动相和样品都没有问题.
请各位大侠分析一下究竟是色谱条件不行,还是色谱柱质量不行啊?目前是按照标准使用过两个牌子的色谱柱,均未得到理想的结果.郁闷中……

Answer 1

虽说不同品牌的氨基柱之间的差异较大,也不致于差异大到你所描述的这个程度.你在第一次分析的时候可以得到理想的结果,说明这个色谱条件是没有问题的,而后来理论板数降低,很明显是柱效能降低的表现.
你四次分析所用的色谱条件如果都是一致的话,这样的问题出现也是很有可能的,只能归结到柱子的效能降低而不是不同品牌之间的差异.
氨基柱在使用时的维护保养工作非常重要,它很容易损坏,极易出现柱效能降低的情况,我建议你先测一下你这四根柱子的柱效.