乳酸菌是一种厌氧型细菌，实验室常利用溶钙圈法对乳酸菌进行筛选，其原理是乳酸菌产生的酸性物质和CaCO3反应而出现的溶解圈，以下为乳酸菌筛选的步骤：①制备乳酸菌筛选培养基（MRS

Question

乳酸菌是一种厌氧型细菌，实验室常利用溶钙圈法对乳酸菌进行筛选，其原理是乳酸菌产生的酸性物质和CaCO₃反应而出现的溶解圈，以下为乳酸菌筛选的步骤：
①制备乳酸菌筛选培养基（MRS培养基）（成分：蛋白质、牛肉膏、无机盐、葡萄糖和水）
②调节pH，并将NRS培养基和CaCO₃溶液灭菌后混合，倒平板制备培养基．
③梯度稀释样品，选择合适的稀释倍数接种．
④挑选产生溶钙圈的菌落．
请回答下列问题：
（1）乳酸菌常用于制作泡菜，用于制作泡菜的泡菜坛要在坛盖边沿的水槽中注满水，其目的是___，制作过程中亚硝酸盐含量的变化是___．
（2）MRS培养基中蛋白胨可以作为乳酸菌的___，CaCO₃一方面可以用于鉴别乳酸菌，另一方面还可以___．对于培养基一般采用___法灭菌．
（3）乳酸菌筛选过程中所用的接种方法是___．若要进一步纯化乳酸菌，可以采取的措施是___．

Answer 1

（1）乳酸菌是厌氧菌，因此用乳酸菌制作泡菜时，用于制作泡菜的泡菜坛要在坛盖边沿的水槽中注满水，其目的是保证乳酸发酵所需的无氧环境；制作过程中亚硝酸盐含量的变化是先增加后减少．
（2）MRS培养基中蛋白胨可以作为乳酸菌的碳源和氮源；CaCO₃一方面可以用于鉴别乳酸菌，另一方面还可以中和乳酸菌产生的酸，以维持培养基的pH值；对于培养基一般采用高压蒸汽法灭菌．
（3）根据题干信息“梯度稀释样品，选择合适的稀释倍数接种”可知，乳酸菌筛选过程中所用的接种方法是稀释涂布平板法．若要进一步纯化乳酸菌，可将挑选出的菌落反复在MRS培养基中划线并筛选．
故答案为：
（1）保证乳酸发酵所需的无氧环境      先增加后减少
（2）碳源和氮源     中和乳酸菌产生的酸，以维持培养基的pH值      高压蒸汽
（3）稀释涂布平板法    将挑选出的菌落反复在MRS培养基中划线并筛选