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双酶切切不开,单酶切正确我现在在构建一个载体,要用到Blp1、Asc1、还有not1,其中的任意两个进行双酶切,但是用其中的每一个酶进行单酶切的时候条带大小是对的,只有一条大小一致的带.用其
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双酶切切不开,单酶切正确
我现在在构建一个载体,要用到Blp1 、Asc1、还有not1,其中的任意两个进行双酶切,但是用其中的每一个酶进行单酶切的时候条带大小是对的,只有一条大小一致的带.用其中的任意两种进行双酶切,条带就被切散了,这三个酶切位点之间的距离都小于100bp,这是什么原因啊,
我现在在构建一个载体,要用到Blp1 、Asc1、还有not1,其中的任意两个进行双酶切,但是用其中的每一个酶进行单酶切的时候条带大小是对的,只有一条大小一致的带.用其中的任意两种进行双酶切,条带就被切散了,这三个酶切位点之间的距离都小于100bp,这是什么原因啊,
▼优质解答
答案和解析
被切散了是什么意思?跑胶有明显条带么还是有拖尾现象?
你在双酶切的时候是同时双酶切的还是先切一个再回收切下一个的?如果直接双酶切要注意温度和时间控制,buffer要选择好,如果效果不好的话可以试一试先切一个再回收切下一个.
你在双酶切的时候是同时双酶切的还是先切一个再回收切下一个的?如果直接双酶切要注意温度和时间控制,buffer要选择好,如果效果不好的话可以试一试先切一个再回收切下一个.
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