人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得．流程如下：（1）htPA基因与载体用切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体．检测目的

Question

人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得．流程如下：

（1）htPA基因与载体用______切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体．检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用______技术．
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其______．采集的精子需要经过______，才具备受精能力．
（3）采用______将重组表达载体导入受精卵，然后将受精卵移入______中继续培养得到早期胚胎．
（4）为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行______．利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的______．
（5）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到______，说明目的基因成功表达．

Answer 1

（1）htPA基因与载体需要用同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）切割，形成相同的黏性末端，然后再通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体．检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交（或核酸探针）技术．
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵．采集的精子需要经过获能（处理），才具备受精能力．
（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是显微注射法．受精卵需移入（胚胎）发育培养液中继续培养得到早期胚胎．
（4）只有母羊能分泌乳汁，为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定，以选择母羊的胚胎进行移植．利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的全能性．
（5）若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA（或人组织纤溶酶原激活物），说明目的基因成功表达．
故答案为：
（1）同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）    DNA分子杂交（或核酸探针）
（2）超数排卵     获能（处理）
（3）显微注射法   （胚胎）发育培养液   
（4）性别鉴定   全能性
（5）htPA（或人组织纤溶酶原激活物）