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为什么高GC序列或者复杂二级结构的序列,PCR反应会效率低下甚至失败?谢谢!
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为什么高GC序列或者复杂二级结构的序列,PCR反应会效率低下甚至失败?谢谢!
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答案和解析
引物需要退火在单链模版上之后DNA聚合酶开始扩增,当GC含量高的时候退火温度显著增加,复杂二级结构也不利于模版变性,简单的说就是双链DNA不容易分开.影响了引物结合在模版链上,另外也影响DNA聚合酶的延伸效率
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