为获得高效降低胆固醇的乳酸菌，科研人员作了如下实验．（1）取适量发酵酸肉，剪碎并研磨，磨碎后加入制成1：10稀释液，再梯度稀释到10-6的稀释液，涂布于添加了CaCO3的乳酸细菌培养

Question

为获得高效降低胆固醇的乳酸菌，科研人员作了如下实验．
（1）取适量发酵酸肉，剪碎并研磨，磨碎后加入___制成1：10稀释液，再梯度稀释到10^-6的稀释液，涂布于添加了CaCO₃的乳酸细菌培养基（MRS 培养基）平板上，在___条件下恒温静置培养48小时．挑取具有___的菌落，用___法接种在MRS培养基上纯化．可通过观察菌落的___判断是否达到了纯化．
（2）纯化后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养，一段时间后离心测定___中胆固醇的含量，以___作为对照，测定菌株降胆固醇的能力，筛选出目的菌株．

Answer 1

（1）根据题意可知，需要将取出的含有乳酸菌的菌株剪碎并研磨，磨碎后加入无菌水制成1：10稀释液，再梯度稀释到10^-6的稀释液，涂布于添加了CaCO₃的乳酸细菌培养基（MRS 培养基）平板上，由于乳酸菌是厌氧微生物，所以需要在无氧条件下下恒温静置培养48小时．挑取具有溶钙圈（或“透明圈）的菌落，用平板划线法接种在MRS培养基上纯化．可通过观察菌落的形态、大小来判断是否达到了纯化．
（2）胆固醇属于脂质，密度较小，存在于上清液中，所以纯化后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养，一段时间后离心测定上清液中胆固醇的含量，以未接种的高胆固醇培养液作为对照，测定菌株降胆固醇的能力，筛选出目的菌株．
故答案为：
（1）无菌水   无氧   溶钙圈（或“透明圈”）   划线   形态、大小
（2）上清液   未接种的高胆固醇培养液