乔治•埃米尔•帕拉德及其同事在探究豚鼠胰腺腺泡细胞合成、运输、分泌蛋白质途径的经典实验中：他们向豚鼠的胰腺腺泡细胞中注射3H标记的亮氨酸，3min后，被标记的亮氨酸出现在附着

Question

乔治•埃米尔•帕拉德及其同事在探究豚鼠胰腺腺泡细胞合成、运输、分泌蛋白质途径的经典实验中：他们向豚鼠的胰腺腺泡细胞中注射³H标记的亮氨酸，3min后，被标记的亮氨酸出现在附着有核糖体的内质网中；17min后，出现在高尔基体中；117min后，出现在靠近细胞膜内侧的运输蛋白质的囊泡中，以及释放到细胞外的分泌物中．
（1）上述实验中，乔治•埃米尔•帕拉德及其同事采用了______等技术方法，通过控制______来探究³H标记的亮氨酸转移路径，证实了分泌蛋白质的合成、运输及分泌与______等细胞器直接相关．
（2）如果注射³H标记的亮氨酸后立即观察，会首先发现放射性出现在细胞质基质中的一种核酸上，该核酸是______；若最终发现放射性出现在豚鼠的小肠腔中，则说明该分泌蛋白是______．
（3）如果将豚鼠的胰腺腺泡细胞放在含³H标记亮氨酸的培养基中培养，则放射性出现在细胞结构中的先后顺序是______．
（4）若将控制合成分泌蛋白的基因直接导人大肠杆菌中，则______（填“能”或“不能”）产生该分泌蛋白．

Answer 1

（1）乔治•埃米尔•帕拉德及其同事在试验中用³H标记的亮氨酸观察，故采用了同位素标记法，通过观察不同时间亮氨酸转移路径，证实了分泌蛋白的形成途径和加工场所，从而发现其合成和加工与核糖体、内质网及高尔基体有关．
（2）含³H标记的亮氨酸在细胞质基质中先和tRNA结合，由tRNA携带到核糖体；若最终发现放射性出现在豚鼠的小肠腔中，则说明该分泌蛋白为消化酶．
（3）如果将豚鼠的胰腺腺泡细胞放在含³H标记亮氨酸的培养基中培养，亮氨酸先通过细胞膜进入核糖体合成多肽，然后在内质网和高尔基体进行加工，最后通过胞吐经细胞膜分泌到细胞外，故放射性出现在细胞结构中的先后顺序是细胞膜→核糖体→内质网→高尔基体→细胞膜．
（4）大肠杆菌为原核细胞，无内质网和高尔基体，不能对分泌蛋白进行加工，故不能产生分泌蛋白．
故答案为：
（1）同位素标记法　　时间　　核糖体、内质、高尔基体
（2）转运RNA　　消化酶（或胰蛋白酶）
（3）细胞膜→核糖体→内质网→高尔基体→细胞膜　　
（4）不能