烟草是种植广泛的经济作物，由于相关病毒的感染会导致大量减产．烟草花叶病毒（TMV）主要由蛋白质外壳和RNA组成，这种病毒感染烟草时能引起花叶病，在烟叶上出现病斑．研究人员利用

Question

烟草是种植广泛的经济作物，由于相关病毒的感染会导致大量减产．烟草花叶病毒（TMV）主要由蛋白质外壳和RNA组成，这种病毒感染烟草时能引起花叶病，在烟叶上出现病斑．
研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如图所示．请分析并回答：

图中过程①表示___，经过程②获得的目的基因两侧除应含有相关___的酶切位点外，目的基因的两端还必须有___．由图分析，构建的重组质粒上含有的标记基因是___基因．过程⑤采用的是___技术，培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加___，以保证受体细胞能经培养再生成植株．过程⑥可采取___的方法，检测植株是否合成了相关蛋白．在个体水平的鉴定过程中，可通过___的方法来确定植株是否具有抗性．

Answer 1

分析题图可知，本题是通过基因工程培育抗TMV的烟草的流程，图中①是由RNA形成DNA的过程，是逆转录过程；目的基因获得后需要用限制性内切酶切割，获得粘性末端；基因要表达还必须有启动子和终止子，因此经过程②获得的目的基因两侧应含有限制酶的切割位点、启动子和终止子；由图分析，受体细胞放在含有卡那霉素的培养基上培养，说明构建的重组质粒上含有的标记基因是卡那霉素抗性基因；过程⑤采用的是植物组织培养；培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加植物激素；分子水平上检测植株是否合成了相关蛋白，可以用抗原-抗体杂交的方法进行检测；个体水平上可以用烟草花叶病毒感染该植株，看该植株对烟草花叶病毒是否具有抗性．
故答案应为：
反转录    限制酶   启动子和终止子  卡那霉素抗性
植物组织培养         植物激素
抗原-抗体杂交     接种烟草花叶病毒